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技術文章

伯樂Trans-Blot SD 半干轉印系統技術參數

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伯樂(Bio-Rad)Trans-Blot® SD 半干轉印系統的詳細技術參數與使用說明書。該系統是經典的半干式電轉印儀,以其結構簡單、緩沖液用量少、轉印速度快而廣泛應用于蛋白質印跡實驗中。


一、伯樂Trans-Blot® SD 半干轉印系統1703940產品概述

Trans-Blot® SD 半干轉印系統是一種經濟高效的半干式電轉印設備。它利用預先被轉印緩沖液浸潤的濾紙堆疊成“三明治"結構,在凝膠和膜之間建立直接的電接觸。與濕轉相比,該系統僅需少量緩沖液,并能在15-60分鐘內完成大部分蛋白的轉印。


二、伯樂  半干轉印系統1703940技術參數

型號:Trans-Blot® SD Semi-Dry Transfer Cell

MAX 轉印面積:16 x 18 cm (可容納一塊標準中型膠或兩塊迷你膠并排)。

電極板:堅固的鉑金涂層陽極板和不銹鋼陰極板,確保電場均勻分布。

電源兼容性:需外接一臺恒壓/恒流/恒功率電源(如Bio-Rad PowerPac™系列)。

推薦電源設置:恒流模式:通常為 0.8 - 2.5 mA/cm2 凝膠面積。

恒壓模式:通常為 10 - 25 V。

轉印時間:15 - 60 分鐘(具體取決于蛋白分子量、凝膠厚度和緩沖體系)。

緩沖液需求:每次轉印僅需 100 - 200 mL 緩沖液(浸潤6-12張濾紙),用量遠少于濕轉系統。

外形尺寸(轉印槽):約 25 cm (長) x 20 cm (寬) x 10 cm (高) (不含電極線)。

重量:約 2.5 kg。

安全特性:帶安全聯鎖蓋的透明上蓋,操作時可自動斷電。


三、伯樂Trans-Blot® SD 半干轉印系統系統組件清單

1、主轉印槽:包含陽極鉑金板。

2、透明安全上蓋:包含陰極不銹鋼板及電極插頭。

3、專用濾紙框架(可選/早期型號):用于固定濾紙,便于操作。

4、使用手冊。


四、伯樂1703940轉印系統操作步驟(標準流程)

A、轉印前準備:

1、配制緩沖液:根據目標蛋白特性選擇合適的半干轉印緩沖液(如:Towbin緩沖液、CAPS緩沖液等)。

2、制備“三明治"組件:

(1)裁剪6張與凝膠尺寸相同的厚濾紙(如Whatman 3MM)。

(2)裁剪 1張 PVDF膜或NC膜。PVDF膜需預先在甲醇中活化1-2分鐘,然后與濾紙一同在轉印緩沖液中平衡。

(3)完成電泳的SDS-PAGE凝膠在轉印緩沖液中平衡5-10分鐘。

3、組裝“三明治"(在盛有緩沖液的淺盤中操作,防止干燥):

(1)順序為:陽極板(+) → 3張浸潤濾紙 → 轉印膜 → 凝膠 → 3張浸潤濾紙 → 陰極板(-)。

(2)關鍵:確保各層間無氣泡。可用玻璃管或 roller 在每鋪一層后仔細滾壓以趕走氣泡。

B、系統組裝與運行:

1、將組裝好的“三明治"對齊放置于陽極板上。

2、蓋上安全上蓋,確保鎖緊。

3、將上蓋的電極插頭與外部電源的對應插座(陰極黑色,陽極紅色)連接。

4、設置電源參數(示例):

(1)恒流模式:對于一塊標準迷你膠(~8x10 cm),設置電流為 150 - 200 mA,時間 30 分鐘。

(2)恒壓模式:設置電壓為 15 - 20 V,時間 30 - 45 分鐘。

(3)注意:總電流不應超過電源和系統的承受能力。

5、啟動電源,開始轉印。過程中會產生熱量,系統無需額外冷卻,但環境溫度不宜過高。

C、轉印后處理:

1、轉印結束后,關閉電源,打開上蓋。

2、小心取出膜,根據后續檢測方法進行染色(如麗春紅S)或封閉。


五、應用指南與優化建議

1、高分子量蛋白(>100 kDa):建議降低電流/電壓,延長轉印時間(如0.8 mA/cm2, 60分鐘),或使用含有SDS的轉印緩沖液。

2、低分子量蛋白(<20 kDa):可適當縮短時間,防止過轉。

3、雙膠轉印:可在中間額外增加一層膜,用于捕獲穿透一層膜的蛋白。

4、緩沖液選擇:

(1)通用型:Tris/Glycine 緩沖液(含甲醇)。

(2)堿性蛋白/高通量:CAPS緩沖液(pH 10-11),適用于后續測序。

(3)膜蛋白/高分子量蛋白:可添加終濃度0.01-0.1%的SDS。


六、維護與保養

1、每次使用后,用去離子水清潔電極板,并用軟布擦干,防止緩沖液鹽分腐蝕。

2、定期檢查電極板是否有劃痕或涂層脫落。

3、存放于干燥清潔處。


總結:Trans-Blot SD 半干轉印系統是一款可靠、經濟的轉印工具,特別適合常規Western Blot實驗。其成功的關鍵在于精確的“三明治"組裝和優化的電轉參數。對于追求更高通量、更快速和標準化流程的用戶,可考慮其升級產品TransBlot? Turbo 系統。

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