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thermo賽默飛QubitFlex熒光計(jì)可以做哪些實(shí)驗(yàn)?

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賽默飛Qubit™ Flex熒光計(jì)的功能。這是一款非常受歡迎的專業(yè)型核酸和蛋白定量?jī)x器,其核心優(yōu)勢(shì)在于高通量、高精度和專一的檢測(cè)。簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō),Qubit Flex熒光計(jì)主要用于對(duì)DNA、RNA、microRNA、蛋白質(zhì)等生物分子進(jìn)行精確定量。它無(wú)法像酶標(biāo)儀那樣進(jìn)行復(fù)雜的細(xì)胞學(xué)或生化實(shí)驗(yàn),但在定量方面,它比普通紫外分光光度計(jì)(如NanoDrop)更準(zhǔn)確、更靈敏。


一、賽默飛QubitFlex熒光計(jì)核心功能:精確定量

與通過(guò)吸光度(A260)測(cè)算的儀器不同,Qubit Flex使用熒光染料技術(shù),這些染料只與特定的目標(biāo)分子(如雙鏈DNA)結(jié)合并發(fā)光,因此幾乎不受鹽、溶劑、游離核苷酸或降解物(如單鏈核酸)的干擾,結(jié)果非常可靠。

1、核酸定量:

dsDNA (雙鏈DNA):這是常用的功能,用于定量下一代測(cè)序(NGS)文庫(kù)、PCR產(chǎn)物、質(zhì)粒DNA、基因組DNA等。準(zhǔn)確性對(duì)NGS文庫(kù)的 pooling 至關(guān)重要。

ssDNA (單鏈DNA):定量用于測(cè)序的單鏈DNA文庫(kù)。

RNA:定量用于轉(zhuǎn)錄組學(xué)分析(如RNA-Seq)、qRT-PCR的高質(zhì)量RNA樣品。

microRNA:專門定量低濃度的microRNA樣品,這對(duì)于miRNA研究非常重要。

2、蛋白質(zhì)定量:

使用特定的蛋白質(zhì)熒光染料,精確定量溶液中的蛋白質(zhì)濃度。這對(duì)于需要精確蛋白上樣量的實(shí)驗(yàn)(如Western Blot、蛋白質(zhì)色譜)非常有用。


二、Qubit Flex 的核心特點(diǎn)和優(yōu)勢(shì)

除了基礎(chǔ)的定量功能,Qubit Flex之所以叫“Flex"(靈活),是因?yàn)樗鼡碛幸韵峦怀鎏攸c(diǎn):

1、高通量:

支持8聯(lián)排管,一次最多可以檢測(cè)8個(gè)樣品,非常適合需要處理大量樣品的實(shí)驗(yàn)室,如核心測(cè)序平臺(tái)、基因檢測(cè)公司等,大大提升了效率。

2、出色的靈敏度和檢測(cè)范圍:

靈敏度高,僅需1-20 μL的微量樣品。

可以檢測(cè)非常低濃度的樣品(如低至10 pg/μL的DNA),這是普通紫外分光光度計(jì)無(wú)法做到的。

3、自動(dòng)化與信息化:

大尺寸觸摸屏界面,操作直觀。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以直接導(dǎo)出數(shù)據(jù)表或生成PDF報(bào)告,方便記錄和追溯。

內(nèi)置條形碼掃描器,可以直接掃描樣品管上的條碼,將樣品信息與檢測(cè)數(shù)據(jù)自動(dòng)關(guān)聯(lián),極大減少了人為錯(cuò)誤,特別符合GLP/GMP實(shí)驗(yàn)室對(duì)數(shù)據(jù)完整性的要求。

4、預(yù)編程實(shí)驗(yàn)程序:

儀器內(nèi)置了所有常用的檢測(cè)程序(如dsDNA HS, RNA HS, Protein等),用戶只需選擇對(duì)應(yīng)的 assay,儀器會(huì)自動(dòng)設(shè)置好參數(shù)。


三、典型應(yīng)用場(chǎng)景

1、下一代測(cè)序(NGS):在構(gòu)建完測(cè)序文庫(kù)后,必須對(duì)每個(gè)文庫(kù)進(jìn)行精確定量,以確保不同文庫(kù)以等摩爾量混合進(jìn)行上機(jī)測(cè)序。這是Qubit Flex最關(guān)鍵的應(yīng)用場(chǎng)景。

2、熒光定量PCR(qPCR, dPCR):在運(yùn)行qPCR實(shí)驗(yàn)前,精確測(cè)定模板DNA或cDNA的濃度,以確保上樣量的準(zhǔn)確性,獲得可靠的Ct值。

3、蛋白質(zhì)組學(xué):在Western Blot、蛋白質(zhì)純化等實(shí)驗(yàn)前,精確測(cè)定蛋白質(zhì)樣品濃度。

4、質(zhì)量控制(QC):作為實(shí)驗(yàn)室樣品質(zhì)量控制的環(huán)節(jié),確保用于下游實(shí)驗(yàn)的樣品在濃度上符合要求。


Qubit Flex熒光計(jì)是分子生物學(xué)和基因組學(xué)實(shí)驗(yàn)室中用于樣品精確定量和質(zhì)量控制的“黃金標(biāo)準(zhǔn)"儀器之一。 如果您的工作流程涉及大量需要精確濃度的核酸或蛋白質(zhì)樣品,那么Qubit Flex是一個(gè)非常理想的選擇。

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